ABTS是什么试剂_abts是什么

1.ABTS+测抗氧化性原理是什么

2.ABTS检测过氧化氢紫外出现负峰是什么原因？

3.ABTS自由基是什么东西

4.酶联免疫诊断试剂盒的底物A和B分别什么作用？

5.高粱谷粒中的酚类物质较丰富主要是以什么为主

用提取物做空白。

如果有颜色，可以用提取物加等量乙醇，与ABTS试剂等量作为空白对照。每种试剂都有一定的空白吸光度范围，试剂空白吸光度的改变往往提示该试剂的变质。

ABTS+测抗氧化性原理是什么

HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。供氢体多为无色的还原型染料，通过反应可生成有色的氧化型染料(D)。酶促反应的过程如下:

HRP

DH2＋H2O2————→D＋2H2O

供氢体的种类很多，形成的产物特点不一。

DAB(3.3－二氨基联苯胺)的反应产物为不溶性沉淀物，并有电子密度，故适宜于做免疫酶染色或电镜观察。

5AS(5-氨基水杨酸)早期曾用于ELISA，但其溶解度不够大，且空白孔不易控制到无色，现已很少应用。

OT(邻联甲苯胺)的特点是能产生鲜艳的蓝绿色产物且灵敏度较高，但反应中受温度影响较大，而且由于产物不稳定，需要在短时间内进行测定。

目前用得较广泛和较满意的供氢体是：OPD(邻苯二胺)和TMB(四甲基联苯胺)。前者形成的产物为深桔**或棕色，后者产物为蓝绿色，二者的可溶性均好，在避光处颜色稳定，空白可近于无色，灵敏度上据报道后者比前者可高4倍以上。

另外，还有一种供氢体称ABTS[2, 2'-边氮基-双(3-乙基苯并噻吡咯啉-6磺酸)]，其反应产物呈蓝绿色，且灵敏度和稳定性均好。尤其是在致癌的潜在可能性方面，ABTS与TMB皆是值得被优选的供氢体。

ABTS检测过氧化氢紫外出现负峰是什么原因？

ABTS+测抗氧化性原理是通过漆酶氧化ABTS的速率来决定漆酶酶活力的大小。

2

,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐，如果与过二硫酸钾反应，可以生成绿色的ABTS自由基。该自由基在734nm有最大吸收，所以，通过检测734nm的吸光度，可以测定的其浓度。

一个物质加入到ABTS自由基溶液后，如果734nm的吸光度降低，则说明该物质具有自由基清除活性，属于抗氧化剂。该法称为ABTS自由基清除法，可以用评价植物（或中草药抽提物）、纯化合物的抗氧化能力的。

此外，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。

扩展资料

以ABTS（7mmol,10equiv.）+K2S2O8(4.9mmol,7

equiv.)的水溶液按1:1的体积比混合，避光情况下储存12-16h，第二天以乙醇稀释40-60倍，摇匀，静置5min，放入比色皿中测734nm的吸光度（0.7左右）。

测试吸光度随时间变化关系，时长为30min，发现吸光度有很明显的下降，30min大概降到0.45左右，换做水稀释时，吸光度下降更为严重，30min大概降到0.15左右。后面要测特定物质湮灭自由基的能力，这种情况势必严重干扰结果。

不过，ABTS自由基的生成需要过二硫酸钾氧化，所以，是一个混合物。而且，反应通常需要12小时，比较耗时。用PTIO自由基替代ABTS自由基进行实验，取得不错的实验结果。PTIO自由基不需要氧化，可以现成的化学品溶于水配制，另外，由于反应是在水溶液或者缓冲液中进行，具有更强的生物相关性。

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ABTS自由基是什么东西

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氧化[yǎng huà]

氧化(oxidation)，狭义的意思为氧元素与其他的物质元素发生的化学反应，也是一种重要的化工单元过程。广义的氧化，指物质失电子（氧化数升高）的过程。

中文名

氧化

外文名

oxidation

特点

氧元素与其他元素发生的化学反应

学科

化学

广义

指物质失电子（氧化数升高）的过程

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生物

人的新陈代谢也像是氧化作用，亦即人体每天都在生锈，所产生的锈在医学里就叫自由基。

自由基是一种带有未配对电子的粒子。因为带有单数电子，所以非常不稳定，具有高度的化学反应性，很容易和周遭的分子反应，使安定分子也变成自由基。如此一再重复，就会衍生大量的自由基。自由基非常活跃，非常不安分。就像我们人类社会中的不甘寂寞的单身汉一样，如果总也找不到理想的伴侣，可能就会成为社会不安定的因素。

一般情况下，生命是离不开自由基活动的。我们的身体每时每刻都从里到外的运动，每一瞬间都在燃烧着能量，而负责传递能量的搬运工就是自由基。当这些帮助能量转换的自由基被封闭在细胞里不能乱跑乱窜时，它们对生命是无害的。但如果自由基的活动失去控制，超过一定的量，生命的正常秩序就会被破坏，疾病可能就会随之而来。

所以说自由基是一把双刃剑，已知有许多疾病皆肇因于自由基作祟，如类风湿性关节炎、急性呼吸窘迫症候群、艾滋病以及牙周病等。自由基除会对细胞产生伤害外，最恶劣的伎俩在于能发动自由基连锁反应，进一步恶化、伤害体内组织。这种连锁反应相当惊人：正常的化学物质系由原子与分子构成且需携带二个成对电子来维持化学状态的安定；而自由基即是含有不成对电子的分子或原子，因此它极须抢夺其它分子或原子的电子凑对，才能安抚它的野性，保持安定。

酶联免疫诊断试剂盒的底物A和B分别什么作用？

ABTS法是使用最广泛的间接检测方法，可用于亲水性和亲脂性物质抗氧化能力测定。ABTs经氧化后生成稳定的蓝绿色阳离子自由基ABTs+·，能溶于水相或酸性乙醇介质中，在414、645、734和815nm处有最大吸收。被测物质加入ABTS+·溶液后，所含抗氧化成分能与ABTs+·发生反应而使反应体系褪色。在ABTs+·的最大吸收波长(一般选择734nm)检测吸光度的变化。

高粱谷粒中的酚类物质较丰富主要是以什么为主

酶联免疫诊断试剂盒（上海科华的试剂盒）的底物A就是显色剂A（含过氧化氢）为供氢体（DH2）,底物B就是显色剂B（含TMB）,用于显色。 另外，常用的底物还有：1）AP的底物，常用的为对-硝基苯磷酸脂（PNP），其反应物为**的对硝基酚，测读波长为405nm2）GOD的底物，为葡萄糖，供氢体为对硝基蓝四氮唑，反应产物为不溶性的蓝色沉淀 什么是TMB？TMB即四甲基联苯胺（3，3’，5，5’-Tetramethylbenzidine）是一种脂溶性较强的基团，因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应，

且由于这种高度的脂溶性，使其易形成多聚体，在HRP活性部位产生粗大的、深兰色沉淀物，这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团。同时反应产物的沉淀，使得HRP的活性部位更加暴露，利于酶氧化反应进行。

TMB的反应产物为深蓝色，利于光镜观察，且反应产物越聚越大，常超出单个细胞器的范围（而DAB则被限制在其内），故TMB反应的检测阈较低。

由于上述优点，目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是：TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外，TMB是一种较强的皮肤刺激剂，并有致癌的潜在可能，故使用时应带手套及在通风条件下操作。

TMB经HRP作用后共产物显蓝色，目视对比鲜明。TMB性质较稳定，可配成溶液试

剂，只需与H2O2溶液混和即成应用液，可直接作底物使用。另外，TMB又有无致癌性等

优点，因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后，TMB产物由蓝色呈

**，可在比色计中定量，最适吸收波长为405nm。

ABTS虽不如OPD和TMB敏感，但空白值极低，也为一些试剂盒所用。

高粱谷粒中的酚类物质比较丰富,主要以游离酚为主。

1、本文提取了高粱糠中的游离酚、可溶性酯型酚、可溶性苷型酚、束缚型酯型酚和束缚型苷型酚,用高效液相色谱法测定其中15种酚类化合物的含量,并对抗氧化能力进行研究,其中包括DPPH自由基、ABTS自由基、O2-自由基清除率的测定,以及Fe3+还原力的测定实验等。

实验结果表明:

1、本实验研究的高粱糠的游离酚、可溶性酯型酚、可溶性苷型酚、束缚型酯型酚和束缚型苷型酚的含量分别为645.27、138.57、48.67、118.92、176.06?mg?GAE/100?g?DW;阿魏酸和水杨酸的含量较高,分别为39.04%和28.04%,3,4-二羟基苯甲酸的含量最低(0.09%);阿魏酸主要以束缚型的形式存在。

2、可溶性酚中的异绿原酸的含量较高,而游离酚中水杨酸的含量最高;不同存在形态的酚类物质的抗氧化能力在不同的抗氧化体系中略有差异,总的来说,束缚型酯型酚、束缚型苷型酚、可溶性酯型酚的抗氧化能力较强,虽然游离酚含量最高,但其抗氧化能力较弱。